Факторы неспецефической защиты

Страница: 9/10

комбинантного штамма (1-2 суток), отделение биомассы, разруше-

ние структур, ресуспендирование в буфере, ультрафильтрация, аф-

финная хроматография супернатанта на колонке с моноклональными

антителами, промывка колонки, срыв ИФ 2М NaCl-?, лиофильная

сушка и стандартизация.

3. Выделение из культуры лейкоцитов, фибробластов и других

клеток:


- 18 -

Схема получения: культуру клеток заражают одним из непато-

генных для человека виросов (вирусы Сендай, болезни Ньюкастля,

везикулярного стоматита), через сутки центрифугируют, надосадок

очищают аффинной хроматографией, ультрафильтрация (для удаления

вирусов-?), лиофилизация, стандартизация.

Длительное введение рекомбинантных ИФ стимулирует образова-

ние у 30% больных АТ к ИФ. Природные ИФ практически не иммуно-

генны. /7492/

Другие противовирусные ингибиторы - липопротеиды, мукопроте-

ин (альфа), подавляющие активность вирусов полиомиелита, клеще-

вого энцефалита, миксовирусов, подавляя адсорбцию вирусов к

клетке.

2VII. ЛИЗОЦИМ

Открыт Флемингом в 1922г.

_Биохимия

Это низкомолекулярный (М.15 кД) щелочной фермент - 1мурамида-

1за 0 (бета-глюкозаминидаза), гидролизирующий связь N-ацетилмура-

мовой кислоты и N-ацетилглюкозамина, содержащиеся в клеточной

стенке некоторых микроорганизмов (растворяет мукополисахариды).

/6528/89/ 4130 аминокислотных остатков.

_Синтез

Синтезируется фагоцитирующими клетками (моноцитами, макрофа-

гами, полиморфоядерными лейкоцитами), накапливаясь в гранулах и

лизосомах, затем поступает в плазму, синовиальные оболочки и

выделяется преимущественно со слюной, слезной жидкостью и моло-

ком. Высвобождение лизоцима из клеток кальций (Са 52+ 0)-зависимо.

_Функции

- Лизирует многие сапрофиты, например, Micrococcus lysodeic-

ticus, и некоторые патогенные бактерии, поврежденные антителами

и/или комплементом. Значение лизоцима как микробицидного факто-

ра невелико в связи с весьма ограниченным его антибактериальным

спектром, который включает в основном сапрофитные бактерии.

/350/84/ Антимикробное действие лизоцима распространяется глав-

ным образом на _Г+ кокки .. /7073/-? 4Кроме лизоцима микробицидную

4активность могут проявлять и другие гидролазы: аргиназа, глико-

4зидаза. /350/84/ 0 Лизоцим проникает до пептидогликанового слоя и

разрушает цитоскелетные элементы.

5- Лизоцим у крупного рогатого скота в преджелудках и у тра-

5воядных обезьян выполняет сходные функции в ферментации расти-

5тельной пищи в ЖКТ. /7959/87/

5- Фрагмент лизоцима Thr-Leu-Lys-Arg обладает иммуномодулиру-

5ющими свойствами (предположительно). /7960/87/ Лизоцим ингиби-

5рует лимфобластогенез и пролиферацию клеток в СКЛ. /7961/86/

Лизоцим способствует репаративным процессам. /7073/ Активирует

фагоцитоз и хемотаксис лейкоцитов. /7073/

_Содержание

Лизоцим содержится в слезах, крови, бронхиальном секрете,

молоке, курином белке и в икре разных рыб. Особенно много лизо-

цима в слюне животных (зализывание ран животными). Этим может

объясняться относительно легкая заживляемость ран и царапин в

ротовой полости, например, после удаления зуба). /293/

- В крови - 2 мг/л (порядка 1 мг/мл). При беременности у че-

ловека индуцируются большие количества лизоцима, который обна-

руживается в плаценте, матке, амниотической жидкости, семенной

плазме, цервикальной слизи. /7982/85/ В женском молоке лизоцима

в 100 тысяч раз больше, чем в коровьем.

- В слезной жидкости в 150 раз больше (устойчивость роговицы

особенно к кокковой микрофлоре; в отношении некоторых кокков

слеза действует в разведении в 10 млн раз /293/).

- Уровень лизоцима наиболее высок в сыворотке новорожденно-

го; держится на высоком уровне до 3 лет, затем с возрастом со-

держание падает.

- В куриных яйцах (лизоцим белка служит надежной защитой

против весьма опасной для него стафилококковой инфекции). /293/

Лизоцим полностью обусловливает бактерицидные свойства свежих

яиц.

_Определение активности . имеет определенное диагностическое

значение при гематологических (лейкоз, гранулематоз), нефроло-

гических, инфекционнных и эндокринных /диабет/ заболеваниях.

/6528/ В качестве стандарта для определения количества (титра)

лизоцима в испытуемом материале служит культура микрококка (ли-

зодеинтикус). /293/

_Антилизоцимная активность микробов . считается фактором пато-

генности. Высокая степень антилизоцимной активности показана

для менингококков, особенно серогрупп А, В и С. /2381к/

_Лизоцимная активность микроорганизмов

Известно, что лизоцимная активность присуща многим бактериям

(Г- и Г+). Функция - регуляция экологии бактерий. /6339/

Наиболеее выраженной лизоцимной активностью обладает

- штамм синегнойной палочки (40%).

- Патогенная кишечная палочка выделяет только от больных

(активность в 33%).

- У стафилококков внешней среды лизоцим обнаружен в 23%, а

от больных - 31%.


- 19 -

- Некоторые сальмонеллы.

2VIII. КАТИОННЫЕ БЕЛКИ

Катионные белки (фагоцитин, лейкин и др.) содержатся в азу-

рофильных и специфических гранулах нейтрофилов и высвобождаются

как в просвет лизосом, так и внеклеточно. При активации нейтро-

филов содержание белков падает. При незавершенном фагоцитозе

высвобождение затормаживается. /2723к/

_Биохимия

4Насчитывается 7 белков, обусловливающих бактерицидное дейс-

4твие. К ним относятся альфа-,бета-,L-лизины (лизоцим, лактофер-

4рин), гистоны, протамины, щелочные полипептиды.

4Катионные белки на 50% состоят из гидрофобных аминокислот и

4в избытке содержат аргинин и лизин. Некоторые из катионных бел-

4ков по своему противомикробному действию напоминают полимиксин

4В и инактивируют Г- бактерии. /7664/84/

4М. бета-лизинов - 6кД.

_ 5Содержатся .в лизосомах лейкоцитов (ткани почек, селезенке,

5легких, головного мозга, надпочечников) и тромбоцитов./272-39/

5Их нет в лизосомах других клеток.

_Свойства

- вызывают повышение проницаемости клеточной стенки бактерий

в присутствии кислорода /анаэробы устойчивы к катионным белкам/

(положительно заряженные белки сорбируются на отрицательно-за-

ряженных поверхностях); тем самым облегчается проникновение ли-

зосомальных ферментов в цитоплазму поглощаемых частиц.

1В настоящее время особо важное значение придается дефензинам

1- богатым аргинином белкам, которые обладают способностью

1встраиваться в липидный слой клетки, нарушать ее проницаемость

1и убивать широкий спектр бактерий, грибов и даже вирусов.

1/2291к/ 0 - ПОВТОР

- или вызывают агрегацию лигандов (инактивируя т.о. микроор-

ганизмы)./272/

- Щелочные полипептиды эозинофилов участвуют в лизисе пара-

зитов. /7073/

- Лактоферрин связывает железо и оказывает бактериостатичес-

кое действие (цитохромы).

Инактивируют Г- микроорганизмы ( и некоторые Г+, например,

бациллы), отчасти кандиды. /272-37/ Катионные белки высокоак-

тивны против кандид и Г+ бактерий, в то время как Е.с. и

Salm.typhimuium более устойчивы к их действию. /350/84/

Катионные белки альвеолярных макрофагов высокоактивны против

кандид и Г+ бактерий - Г+ бацилл и др. (Г- кишечная палочка и

сальмонеллы устойчивы к их действию).

_Синтез

Основными продуцентами бета-лизинов служат тромбоциты, сте-

пень разрушения которых при свертывании крови коррелирует с

возрастанием уровня бета-лизинов.

2IX. NO 5- 0 (окисел азота)

Высвобождение оксида азота (NO) из лейкоцитов, эндотелиаль-

ных, тучных клеток, нервных окончаний оказывает мощное

- микробицидное,

- цитоцидное,

- противовоспалительное,

- противоишемическое,

- противотромботическое,

- цитопротективное действие. /2734к/

Слюной поддерживается нормальный уровень генерации NO в тка-

нях полости рта. /2734к/

5Синтез происходит только в присутствии L-аргинина, который

5является исходным продуктом, подвергающимся воздействию

5NO--cинтетазы. NO- является промежуточным продуктом превращения

5L-аргинина, окончательный же продукт - NO 42 5, по уровню которого

5в моче или культуральной жидкости можно судить об интенсивности

5синтеза. /2294к/

Синтез индуцируется ФНО, ИЛ-1 и др. /2372к-х/

Альфа-ФНО активирует NO-синтетазу, вызывающей образование

NO-реактивных метаболитов. ИЛ-10 ингибирует NO-синтетазу.

/2294к/95/ Пути генерации окиси азота и супероксиданиона в фа-

гоцитах конкурентны: продукция окиси азота (опухольинфильтриру-

ющими макрофагами) сопровождается уменьшением продукции супе-

роксиданиона (в перитонеальных макрофагах наоборот). /2445к/98/

Высокая активность нитрооксид(NO)cинтетазы обнаружена в ней-

ронах. Обильную NO-ергическую иннервацию получают артериолы

подслизистой основы и слизистой оболочки пищевода.

NO-синтетаза, как фермент энергетического обмена, появляется

Реферат опубликован: 16/06/2005 (17842 прочтено)